小鼠特应性皮炎模型全解：从“造模”到“解模”，直击瘙痒炎症核心

🧷 信息卡（速览）

• 常用品系：C57BL/6J（机制广泛）、BALB/c（偏 Th2 易表型）、NC/Nga（常温饲养下自发 AD）。

• 主要诱导物：

• MC903（卡泊三醇）：日涂耳/背 1–2 周 → TSLP↑/ILC2↑ 的 AD 样炎症；

• DNCB/氧唑酮（OXA）：致敏 + 反复挑战 → 接触性/AD 样混合炎症；

• 关键读数：临床评分（红/肿/抓痕/鳞屑）、耳厚、经皮水分流失 TEWL、瘙痒次数、HE/肥大细胞/嗜酸性粒细胞、血清 IgE、皮肤/淋巴结 qPCR/ELISA/流式。

  
  

📚 背景

人类 AD 由“屏障缺陷（FLG/脂质）→上皮警报（TSLP/IL-33/IL-25）→Th2/ILC2 级联”驱动，并深受微生物群（S. aureus 定植）与神经—免疫瘙痒（IL-31/神经肽）调制。单一模型难以涵盖全部环节，因此需要按问题选模型。

🧪 两套“上手最快”的模型 SOP

下列配方为常用范围/范式，不同供应商批次/载剂略有差异；先做小样剂量探索，并严格伦理与镇痛护理。

SOP 1｜MC903（卡泊三醇）外用模型（偏 TSLP/ILC2）

原理：维生素 D 受体激动 → 角质细胞 TSLP/IL-33 上调 → ILC2/Th2 驱动的 AD 样炎症与瘙痒。

材料：MC903（溶于乙醇/丙二醇）、微量移液器、耳厚计/TEWL 仪。

对象与部位：C57BL/6J 或 BALB/c；耳廓（无需剃毛）或剃毛背部。

步骤（示例）

1. 配制：MC903 工作液；车辆对照为同溶剂。

2. 给药：每日一次，10–20 μL/耳（背部可按面积折算），连续 8–14 天。

3. 监测：每 2–3 天记录 耳厚、临床评分；末期测 TEWL、瘙痒次数（摄像 30–60 min 计数）。

4. 结局：取耳/背皮与引流淋巴结做 HE、肥大细胞染色、嗜酸性粒细胞计数，皮肤 qPCR/ELISA（TSLP、IL-33、IL-25、IL-4/5/13、IL-31），流式计数 ILC2（Lin−ST2+KLRG1+）/Th2（CD4+GATA3+）。

优缺点：表型稳定、重现性好；偏向上皮-ILC2-TSLP轴，IgE 升高有限（可联用过敏原/细菌增强）。

SOP 2｜DNCB / 氧唑酮（OXA）致敏-挑战（接触+AD 样）

原理：半抗原致敏并反复挑战 → 急性 Th2 为主，慢性期混合 Th1/Th17，模拟“复燃”。

材料：DNCB 或 OXA（溶于乙醇/丙酮/油剂）、贴敷材料、耳厚计。

步骤（示例）

1. 致敏（Day 0）：在剃毛背部点涂高浓度（如 DNCB 0.5–1%，或 OXA 1–3%）。

2. 挑战（Day 5 起）：在耳廓或背部以低浓度（如 DNCB 0.1–0.5%，OXA 0.1–1%）每 2–3 天一次，连续 2–4 周。

3. 监测：耳厚/临床评分/TEWL；必要时设单次急性挑战与多次慢性挑战两组。

4. 结局：血清 总 IgE/特异 IgE，皮肤 HE（海绵样变、棘皮增厚）/肥大细胞（甲苯胺蓝），qPCR/ELISA（IL-4/13、IFN-γ、IL-17A、IL-22），流式 Th2/Th1/Th17 比例。

优缺点：流程贴近临床“致敏-复燃”；但剂量过高可呈刺激性皮炎而非免疫性，需小样滴定。

📏 评价体系｜“多维读数”清单（建议至少三项并行）

1) 临床样式评分（简化 EASI）

• 红斑、肿胀/硬结、抓痕/糜烂、干燥/鳞屑四项，每项0–3 分，两耳或背部累加。

• 耳厚：游标卡尺定点测量（≥3 次取均值）。

• TEWL：Tewameter 或同类仪器，固定温湿度与适应时间（≥5 min）。

2) 瘙痒行为

• 录像 30–60 min；定义抓挠/摩擦一次的起止标准；盲法计分或半自动识别。

3) 组织学与细胞学

• HE：表皮厚度、海绵样变、角化不全；

• 肥大细胞（甲苯胺蓝）、嗜酸性粒细胞（HE/MBP 染色）；

• 免疫染色：TSLP/IL-33、p-STAT6、PGP9.5（神经）。

4) 体液与分子

• 血清总 IgE/特异 IgE（ELISA）；

• 皮肤匀浆或 RNA：IL-4/5/13、IL-31、TSLP、IL-33、IL-25、CCL17/22、Filaggrin/Loricrin；

• 流式：ILC2（Lin−ST2+KLRG1+）、Th2（CD4+GATA3+）、嗜酸性粒细胞（Siglec-F+）、肥大细胞（c-Kit+FcεRI+）、树突细胞（CD11c+MHCII+CCR7+）。

  
  

🧯 常见翻车点与解决

• 表型过弱：抗原/剂量偏低、屏障破坏不足 → 小样滴定；记录批次；固定给药面积与体表含水量。

• 刺激性皮炎（非免疫性）：剂量过高/溶剂过刺激 → 降低浓度、更换载剂，对照组设不同溶剂。

• 变异大：不同操作者/时间窗 → 固定时间（昼夜节律）、单一操作者、预注册评分表。

• 瘙痒计分主观：盲法双评或半自动算法；提前设定“抓挠一次”的标准。

• 感染/溃疡：尤其细菌协同模型 → 提前设人道终止、局部护理与镇痛；必要时剔除样本并如实报告。

  
  

🧑‍⚕️ 伦理与动物福利（必读）

• 通过 IACUC/等同伦理审批；

• 最小有效剂量与频次；避免深度屏障破坏导致渗血/溃疡；

• 建立镇痛/保湿护理流程（如凡士林对照侧亦需统一处理）；

• 设定退出/终止标准（体重↓ >15%、持续溃疡/感染、不可控瘙痒）。

  
  

参考文献：Choi ED, Voehringer D, Radtke D. Basophils in Skin-Mediated Sensitization Drive Subsequent Lung Inflammation in Airway-Challenged Mice. Allergy. 2025 Oct 11. doi: 10.1111/all.70093. Epub ahead of print. PMID: 41074677.